微生物檢測的三種情況
1 .一般性狀
微生物檢測的一般性狀包括外觀、厚度、 pH 值等。剛配制的液體培養(yǎng)基,其外觀應(yīng)透明、清亮、無混濁、無沉淀,顏色符合要求。新鮮的固體培養(yǎng)基應(yīng)具有特定的顏色,表面濕潤但無水汽、平整、光潔無凹坑和氣泡。整塊平板厚薄均勻,一般厚度在 3mm ,但 MH 平板的厚度不得小于 4mm 。斜面的長度不得超過試管長度的 2 / 3 。應(yīng)經(jīng)常觀察貯存培養(yǎng)基的質(zhì)量是否合格。若試管內(nèi)液體培養(yǎng)基液面降低,表明水分蒸發(fā),培養(yǎng)基濃縮。當(dāng)固體培養(yǎng)基發(fā)生顏色改變,表面干燥,出現(xiàn)裂紋或邊緣的瓊脂與平板或試管分離時,應(yīng)不再使用。培養(yǎng)基的 pH 是細(xì)菌生長的重要條件之一,一般而言合格培養(yǎng)基的 pH 應(yīng)在規(guī)定值上下 0.2 的范圍內(nèi)。
2 .無菌試驗(yàn)
新制備的
微生物檢測要按批號隨機(jī)抽取一定數(shù)量的樣品作無菌試驗(yàn)。對于壓力蒸氣滅菌后傾注的固體培養(yǎng)基,抽樣后放 35 ℃ ± 1 ℃ 溫箱培養(yǎng) 24-48h ;滅菌后經(jīng)無菌操作分裝的液體培養(yǎng)基要全部放入 35 ℃ ± 1 ℃ 溫箱內(nèi)培養(yǎng) 24h ;對有些無需高壓滅菌只需煮沸消毒的選擇性培養(yǎng)基要取部分瓊脂,放入無菌肉湯管培養(yǎng) 24h :上述試驗(yàn)證實(shí)無細(xì)菌生長時才算合格。若有細(xì)菌生長,說明培養(yǎng)基制備過程中已受雜菌污染,除了尋找原因外,應(yīng)不再使用。
3 .細(xì)菌生長試驗(yàn)
所有的
微生物檢測在使用前除了做無菌試驗(yàn)外還必須做細(xì)菌生長試驗(yàn)以測定培養(yǎng)基性能是否符合要求。要用已知的標(biāo)準(zhǔn)菌株按照 NCCLS 推薦的方法作質(zhì)控。質(zhì)控所需的標(biāo)準(zhǔn)菌株分 2 種:一種是已知的可在某種培養(yǎng)基上生長并產(chǎn)生典型生物學(xué)性狀的,對培養(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陽性反應(yīng)的菌株;另一種是用已知的不能在某種培養(yǎng)基上生長或?qū)ε囵B(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陰性生化反應(yīng)的菌株。表 2 列出 10 種常用固體培養(yǎng)基的質(zhì)量鑒定標(biāo)準(zhǔn)及所需標(biāo)準(zhǔn)菌株。
無論是廠家的成品
微生物檢測還是實(shí)驗(yàn)室自制的培養(yǎng)基,都應(yīng)經(jīng)過上述三方面的檢驗(yàn)才能證實(shí)其質(zhì)量是否合格。廠家應(yīng)將所做的試驗(yàn)內(nèi)容形成書面的質(zhì)量鑒定送交客戶保存。實(shí)驗(yàn)室自行配制過程中應(yīng)對上述鑒定內(nèi)容有明確記載。此外還應(yīng)對培養(yǎng)基配制原料的性狀、批號、失效期以及配制過程各個環(huán)節(jié)的操作形成記錄。